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Servicios Científico-Técnicos

Microscopía Óptica Avanzada

Descripción del servicio

El Servicio de Microscopía Óptica Avanzada presta sus servicios tanto a los miembros del propio instituto como a interesados externos, ya sean pertenecientes a organismos públicos como a entidades privadas. El servicio incluye el encendido y puesta en marcha de los equipos y la asistencia técnica por el personal responsable.

El tipo de muestras que se puede analizar mediante microscopía de fluorescencia o confocal es muy variado. En nuestro servicio las muestras que usualmente analizamos son cultivos in vivo de cianobacterias o microalgas, tejidos vegetales (hojas, raíces y tallos) o plántulas enteras, cortes de tejidos vegetales y animales y en algunas ocasiones superficie de metales.

Las principales aplicaciones que se realizan son:

    • Localización subcelular de proteínas in vivo mediante el uso de fusiones con proteínas fluorescentes (GFP, YFP; CFP…).
    • Estudios de expresión celular mediante fusión de promotores con genes “reporter” de proteínas fluorescentes.
    • Obtención de secciones en series para la reconstrucción de 2D y pseudo 3D.
    • Estudios de BIFC.
    • Detección de marcajes inmunocitoquímicos.
    • Análisis de colocalización.
    • Experimentos de “time-lapse”.
    • Técnicas de FRET y FRAP.

Equipamiento

El Servicio de Microscopía Óptica Avanzada dispone de un microscopio de fluorescencia Leica DM6000B y de un microscopio confocal láser espectral de barrido (LCSM) Olympus FLOUVIEW FV3000 cuyas especificaciones técnicas son:

    • Microscopio de fluorescencia Leica DM6000B:
      • Software: Leica LAS AX con módulo de deconvolución.
      • Iluminación: lámpara halógena 12V-100W y de mercurio HPX® 120 W.
      • Cubos de Fluorescencia: A (DAPI-LP), +A4 (DAPI), +L5 (FITC), +TX2 (TEXA-RED), Y7 (CY7), CFP, YFP.
      • Objetivos: HCX PL FLUOTAR 10x/0.30, HCX PL S-APO 40x/0.75, HCX PL APO 63x/1.30 Oil, HCX PL APO 100x/1.40-0.70 Oil.
      • Cámara digital: Hamamatsu ORCA-ER (Mod. C4742-80-12AG).
    • Microscopio confocal láser espectral de barrido (LCSM) Olympus FLOUVIEW FV3000:
      • Microscopio: microscopio de fluorescencia Olympus IX83 motorizado en XYZ que permite realizar imágenes tipo “Macro to Micro”.
      • Software: FV31S-SW de adquisición con módulo de Super-Resolución (TruSigthTM) hasta 120 nm de resolución lateral y cellSens para análisis con módulos de FRET y FRAP y deconvolución 3D.
      • Epifluorescencia: dispositivo pE-300white. Cubos de fluorescencia: U-FUW(DAPI), U-FBN (FITC) y U-FGWA (Rodamina).
      • Láseres: tipos diodos de 405 nm (50mW), 445 nm (75 mW), 488 nm (20mW), 514 nm (40 mW), 561 nm (20 mW), 640 nm (40 mW).
      • Módulo de barrido híbrido: escáner galvanométrico (16 fps @512×512) y resonante (438 fps 512×32 y 30 fps @512×512).
      • Detectores: 4 PMT para fluorescencia (2 GaAsP y 2 multi-alcalino) y 1 PMT para luz transmitida.

Objetivos: PLANPON 1.25X/0.04 DRY, X-Line 4x/0.1 3, X-Line 10x/0.4 DRY.A-Line 30x/1.05 Silicone, X-line 40x/1.4 Oil, A-Line 60x/1.5 Oil.

    Normas de funcionamiento

    Si deseas utilizar el Servicio de Microscopia Óptica Avanzada debes reservar horas con al menos 7 días de antelación, llamando al 954489611 o mandando un correo a .

    Es imprescindible para utilizar este servicio rellenar el impreso de solicitud con la autorización, y entregarlo al responsable de dicho servicio.

    Las horas de utilización de equipos y prestación de servicios se facturarán de acuerdo con las tarifas adjuntas.

    El servicio asignará las horas solicitadas en función de las disponibilidades de equipos existentes y la lista de espera de usuarios.

    En caso de necesitar más horas de las concertadas, se solicitará una nueva asignación.

    La anulación de reservas deberá realizarse, siempre que sea posible, antes de las 48 horas.

    La preparación de la muestra correrá a cargo del usuario, debiendo traerlas ya preparadas y montadas, siempre que el material permita hacerlo con antelación. En caso de que fuera necesario montar la preparación inmediatamente antes de la observación, el usuario deberá aportar el material necesario.

    Se prestará asistencia técnica para el estudio y observación del espécimen en las mejores condiciones posibles.

    Antes de hacer uso de la técnica de confocal se recomienda la observación en los propios laboratorios de las muestras, verificando el éxito o no del experimento.

    Los resultados del trabajo se proporcionan por la vía que acuerden con el técnico.

    El almacenamiento de los resultados en los discos duros de los equipos es temporal, y pasarán a ser eliminadas sistemáticamente de forma semanal.

    Tarifas

     

    Coste Marginal IIQ-ICMS CSIC-US AGE-OPIs-UNIV. EMPRESAS
    Mic. Confocal Olympus FV3000 (con técnico) 17.05 18.52 20 97.13 106.38
    Mic. Fluorescencia(con técnico) 0.64 0.69 0.75 47.62 79.37
    Mic. Fluorescencia (sin técnico) 0.64 0.69 0.75 0.94 1.57

    Precios en €/hora

    Precios válidos hasta marzo de 2025.

    Descargar tarifas en PDF

    Solicitud de servicio

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