Colecciones

1. CIANOBACTERIAS

Las cianobacterias son microorganismos que, en una organización procariótica, son capaces de realizar una fotosíntesis oxigénica similar a la de plantas superiores. Se agrupan en cinco Secciones, cuyas características básicas se exponen a continuación. En el Servicio de Cultivos Biológicos del Centro de Investigaciones Científicas Isla de la Cartuja se dispone de una colección de cianobacterias con representantes para cada una de las Secciones.

Condiciones de cultivo

Los medios más utilizados para el cultivo de las cianobacterias de la colección son el medio BG110 y el medio ASN-III (RippKa et al, 1979). Para medio sólido se utiliza Bacto-Agar (1% p/v).

Las distintas estirpes se cultivan en condiciones de fotoautotrofía en cámara termostatizada a 30°C.

Secciones

 

Unicelular; células simples o formando agregados rodeados de capas de pared celular externa adicionales

Reproducción por división binaria o por gemación

Sección I

Reproducción por fisión múltiple dando lugar a pequeñas células hijas (baeocitos) o por fisión múltiple y fisión binaria.

Sección II

Filamentosas; un tricoma (cadena de células) que crece por división de células intercalares

Reproducción por formación de hormogonios, por rotura al azar del tricoma, y (s. IV y V) algunas veces por germinación de acinetos.

Tricoma compuesto siempre de células vegetativas

División en un plano

Sección III

En la ausencia de nitrógeno combinado los tricomas tienen heterocistos, algunos también acinetos

División en un plano

Sección IV

División en más de un plano

Sección V

 

Listado de estirpes (Fotos de la colección-pdf)

NOMBRE

Sección

Condiciones de crecimiento

Acaryochloris marinaNBRC 102967 (MBIC11017)

I

Medio Acaryochloris (medio 963, NITE)

Anabaena azollaeAS-DS

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Anabaena cylindricaATCC 29414

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Anabaenasp. ATCC 33047

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Anabaenasp. PCC 6411 (ATCC 27898)

IV

BG110 +/- fuente de N. No fija N2 en aerobiosis.

Anabaena sp. PCC 7119 (ATCC 29151)

IV

BG110 +/- fuente de N. (nitrato o amonio).

Anabaenasp. PCC 7120 (ATCC 27893)

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato, amonio o urea).

Anabaenavariabilis ATCC 29413 (PCC 7937)

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Anabaenasp. Universidad de Leningrado 458 (PCC 7118)

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio). No fija N2 en aerobiosis.

Anabaenasp. Universidad de Tokio M131

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio). No fija N2 en aerobiosis.

Anabaena variabilisATCC 29413 - FD

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Anabaena variabilisATCC 29413 - P9

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Anacystis nidulansL-1402-1

I

BG11.

Arthrospira maxima

III

BG11C.

Calothrix (Tolypothrix)sp. PCC 7601

(Fremyella diplosiphon UTEX 481)

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio). Fija dinitrógeno en anaerobiosis.

Calothrix sp. PCC 9327

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Chlorogloeopsissp. PCC 6912 (ATCC 29193)

V

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Chroococcidiopsis thermalis PCC 7203

(Myxosarcina chroococcoides)

II

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio). Fija dinitrógeno en anaerobiosis

Chroococcidiopsis sp. PCC 9317

II

BG11

Cyanothece sp. PCC 7425

I

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio). Fija dinitrógeno en anaerobiosis

Cyanothece sp. PCC 9318

I

BG11

Dermocarpasp. PCC 7437 (Stanieria) (ATCC 29371)

II

BG11

Fischerella muscicola PCC 73103

V

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Fischerella muscicola PCC 7414

V

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Fischerella muscicolaUTEX 1829

V

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Gloeobacter violaceus sp. PCC 7421

I

BG11

Gloeocapsa sp. PCC 9319

I

BG11

Geitlerinema sp. PCC 9326

III

BG11

Leptolyngbya sp. PCC 9324

III

BG11

Lyngbya sp. PCC 8106

I

BG11/ASN-III (1:1). Fija dinitrógeno en anaerobiosis.

Nodularia chucula

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio)

Nostoc ellipsosporum(Univ. de Göttingen B1453-79)

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Nostoc paludosum  PCC 9206

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Nostoc sp. ATCC 29133

(PCC 73102) N. punctiforme

IV

BG110 + TES 10 mM pH 7,5 +/- fuente de N (nitrato o amonio)

Nostocsp. 78-IIA-E (ATCC 43237)

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Nostocsp. caquena

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio)

Nostocsp. llaita

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Nostocsp. PCC 6705 (ATCC 29131)

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Nostocsp. PCC 6719 (ATCC 29105)

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Nostocsp. PCC 6720 (ATCC 27899)

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Nostocsp. PCC 7107 (ATCC 29150)

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Nostocsp. PCC 7413 (ATCC 29106)

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Nostoc sp. PCC 9201

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio)

Nostoc sp. PCC 9202

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Nostocsp. PCC 9203

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio)

Nostoc sp. PCC 9204

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio)

Nostoc sp. PCC 9329

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Nostoc sp. PCC 9331

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Oscillatoria sp. PCC 9325

III

BG11

Phormidium laminosum (Agardh) Gom. OH-1-pC11

III

BG11. Termófilo (45°C)

Phormidium persicinum 80.79

III

Medio f/2 de Guillard

Pseudanabaenasp. PCC 6903 (ATCC 27190)

III

BG11

Pseudanabaena sp. PCC 9330

III

BG11

Scytonemasp. PCC 7110 (ATCC 29171)

IV

BG110 +/- fuente de N (nitrato o amonio).

Spirulinasp. PCC 6313  (ATCC 29542)

III

BG11/ASNIII (1:1)

SynechococcusA6

I

BG11.

SynechococcusM4-

I

BG11.

Synechococcussp. PCC 6301 (ATCC 27144)  “S. leopoliensis

I

BG11

Synechococcussp. PCC 7202 (ATCC 29140)

I

BG11 + 10% ASN-III.

Synechococcussp. PCC 7335

I

ASN-III. Fija dinitrógeno en anaerobiosis.

Synechococcussp. PCC 7942  (Anacystis nidulans R2)

I

BG11

Synechococcus sp. PCC 9321

I

BG11

Synechocystissp. PCC 6308 (ATCC 27150)

I

BG11

Synechocystissp. PCC 6803 (ATCC 27184)

I

BG11

Synechocystis sp. PCC 9320

I

BG11

Synechocystis sp. PCC 9322

I

BG11

Synechocystis sp. PCC 9323

I

BG11

Thermosynechococcus elongatusBP-1

I BG11. Termófilo (45°C)


2. ALGAS

Las algas son organismos eucariotas (con numerosas excepciones), acuáticos, (con frecuentes excepciones), autótrofos con fotosíntesis oxigénica y con un tamaño menor y una estructura menos compleja que los de las plantas terrestres. Se trata de un grupo de organismos no monofilético para el que se pueden distinguir, dependiendo de los autores, diferentes phyla o divisiones: Glaucofita, Euglenofita, Cryptofita, Haptofitas,  Dinofitas, Ochrofitas, Rodofitas y Clorofitas (ver características principales en la tabla siguiente). En el Servicio de Cultivos Biológicos del Centro de Investigaciones Científicas Isla de la Cartuja se dispone de una colección de microalgas con representantes de estas Divisiones.

Condiciones de cultivo

El medio utilizado para el cultivo de las microalgas de la colección varía en función de la estirpe en cuestión. Por regla general, las microalgas se mantienen en medio solidificado con Bacto-agar (1% p/v), o bien, en medio líquido en tubos de cultivo.

Las distintas estirpes se cultivan en condiciones de fotoautotrofía en cámara termostatizada a 25°C.

Phyla o divisiones

 

 

Pigmentos fotosintéticos

Productos de almacén

Cubierta celular

Glaucofitas

Clorofila a, ficocianina, aloficocianina, ficoeritrina, b-caroteno, xantofilas

Almidón

Algunas celulósicas

Euglenofitas

Clorofila a y b,

b-caroteno, otros carotenos y xantofilas

Paramilon

Película proteínica bajo membrana plasmática

Cryptofitas

Clorofila a y c ficocianina, aloficocianina, ficoeritrina, ay b-caroteno, xantofilas

Almidón

Película proteínica bajo la membrana plasmática

Haptofitas

Clorofila a y c,

 b-caroteno, xantofilas

Crisolaminarina

Escamas de CaCO3

Dinofitas

Clorofila a y c,

b-caroteno, xantofilas

Almidón

Placas celulósicas bajo la membrana plasmática

Ochrofitas (diatomeas, crisófitas, algas marrones…)

 

 

(eustigmatofitas)

Clorofila a y c,

b-caroteno, xantofilas

 

 

 

Clorofila a,

b-caroteno, xantofilas

Crisolaminarina, lípidos

 

 

 

 

Crisolaminarina

Algunas desnudas, otras con escamas orgánicas/silíceas, otras con celulosa o alginato

 

Presente, pero de composición desconocida

Rodofitas

Clorofila a ficocianina, aloficocianina, ficoeritrina, ay b-caroteno, xantofilas

Almidón florideano

Celulosa, polisacáridos sulfatados; algunos calcificados

Clorofitas

Clorofila a y b,

b-caroteno, otros carotenos y xantofilas

Almidón

Pared de celulosa u otros polímeros; escamas sobre algunos; otros desnudos; otros calcificados

(Algae, 2000, Graham LE and Wilcox LW eds., Prentice Hall Inc, USA)

 

Listado de estirpes (fotos de la colección-pdf)

NOMBRE

Tipo

Condiciones de crecimiento

Astasia longa1204-17a

Euglenofita

Medio Euglena

Chlamydomonas augustae(C. nivalis o Chloromonas reticulata) CCAP11/51,

SAG 26.86

Clorofita

SUEOKA. Nit+

Chlamydomonas euryale25-89

Clorofita

SUEOKA.  Nit -

Chlamydomonas reinhardtii 21gr (+)

Clorofita

SUEOKA. Nit+

Chlamydomonas reinhardtii  137c (+)

Clorofita

SUEOKA. Nit -

Chlamydomonas reinhardtii  CC124 (-)

Clorofita

SUEOKA. Nit -

Chlamydomonas reinhardtii  CC621 (-)

Clorofita

SUEOKA. Nit -

Chlamydomonas reinhardtii CF10 (-)

Clorofita

SUEOKA. Nit+

Chlamydomonas reinhardtii  CF11 (-)

Clorofita

SUEOKA. Nit -

Chlamydomonas reinhardtii  CF14 (+)

Clorofita

SUEOKA. Nit+

Chlamydomonas reinhardtii CW15-325 (+)

Clorofita

SUEOKA. Nit + Arg -

Chlamydomonas reinhardtii CW15 (-)

Clorofita

SUEOKA. Nit +

Chlamydomonas reinhardtii 704 (+)

Clorofita

SUEOKA. Nit +

Chlorella sp. CCAP 211/84

Clorofita

EG:JM. Nit +

Chlorella fusca(C. emersonii) 211-8b

Clorofita

SUEOKA. Nit +

Chlorella salina8-86

Clorofita

Medio f/2 de Guillard

Chlorella sorokiniana211-32

Clorofita

SUEOKA. Nit +

Chlorella stigmatofora 9.86

Clorofita

Medio f/2 de Guillard

Chlorella vulgaris 9-88 (UAM 101)

Clorofita

SUEOKA. Nit +/-

Chlorella zofingiensis211/14

Clorofita

SUEOKA. Nit +/-

Chlorococcum citriforme62.80

Clorofita

SUEOKA. Nit +

Chromera velia CCAP 1602/1

Apicomplexa

Medio f/2 de Guillard

Coelastrum proboscideum

(var. dilatatum) 217-2

Clorofita

SUEOKA. Nit +

 

Coelastrum proboscideum

(var. gracile) 217-3

Clorofita

SUEOKA. Nit +

 

Cryptomonas sp.06/0101

Criptofita

Medio f/2 de Guillard

Cyanidium caldarium16-91

Rodofita

Medio Cyanidium

Cyanophora paradoxa

Glaucofita

BG11 (2 mM NaNO3)

Dunaliella salina

Clorofita

Medio Dunaliella

Euglena gracilisSAG 5-9

Euglenofita

Medio Euglena

Euglena gracilis SAG 5-15

Euglenofita

Medio Euglena

Euglena gracilis SAG 5-25

Euglenofita

Medio Euglena

Galdieria sulphuraria 74W

Rodofita

Medio Cyanidium

Haematococcus lacustris192.80

Clorofita

Medio H

Haematococcus lacustrisATCC 30453

Clorofita

Medio H

Haematococcus pluviales CCAP 34/8

Clorofita

Medio H

Haematococcus pluvialisSAG 192.80

Clorofita

Medio H

Haematococcus pluviales SAG 34-1b

Clorofita

Medio H

Heterocapsa sp. 09/0601

Dinofita

Medio f/2 de Guillard

Isochrysis galbana 05/0401

Ochrofita

Medio f/2 de Guillard

Micromonas pusilla RCC 827

Prasinofícea

Medio Acaryochloris

Monoraphidium braunii202.7d

Clorofita

SUEOKA. Nit +

Monoraphidium circinale

Clorofita

Medio f/2 de Guillard (0,25x)

Muriellopsissp. IBVF-L4

Clorofita

SUEOKA. Nit +

Nannochloropsis gaditana

Ochrofita

Medio f/2 de Guillard

Nannochloris atomus SAG 14.87

Clorofita

Medio f/2 de Guillard

Nannochloris maculata 251/3

Clorofita

Medio f/2 de Guillard

Nannochloropsis oculata 38.85

Ochrofita

Medio f/2 de Guillard

Nannochloropsis salina40.85

Ochrofita

Medio f/2 de Guillard

Navicula pelliculosa1050-3

Ochrofita

Específico

Neochloris oleoabundans UTEX 1185

Clorofita

BG11

Neospongiococcum (Chlorococcum) gelatinosum 64.80

Clorofita

SUEOKA. Nit +

Nephroselmis olivacea CCAP 1960/4B

Prasinofícea

3N-BBM+V (CCAP)

Ochromonas danica933-7

Ochrofita

Medio Euglena

Ostreococcus tauri RCC745

Clorofita

Medio f/2

Phaeodactylum tricornutum 07/0502

Ochrofita

Medio f/2 de Guillard

Phaeodactylum tricornutum CCAP 1055/1

Ochrofita

Medio f/2 de Guillard

Porphyridium purpureum1380-1a

Rodofita

Medio f/2 de Guillard

Poterioochromonas malhamensis CCAP 933/1C

Ochrofita

Medio Euglena

Pycnococcussp. RCC245               

Prasinofícea

Medio Acaryochloris

Pycnococcus provasoliiCCAP 190/1

Prasinofícea

Medio f/2 de Guillard

Rhodomonas baltica 06/0301

Criptofita

Medio f/2 de Guillard

Rhodomonas salina

Criptofita

Medio f/2 de Guillard

Scenedesmus vacuolatus  SAG 211-15

Clorofita

SUEOKA. Nit +

Spirogyra sp SAG 170.80

Zygnematofícea

BG11

Tetracystissp.

Clorofita

SUEOKA. Nit +

Tetraselmis chuii 8-6

Prasinofícea

Medio f/2 de Guillard.

Tetraselmis chuiRCC128               

Prasinofícea

Medio Acaryochloris

Tetraselmis suecica03/0203

Clorofita

Medio f/2 de Guillard.


3. ESCHERICHIA COLI

Escherichia coli es una enterobacteria muy utilizada en trabajos de biología molecular. Es una bacteria de rápido crecimiento de la que se conoce la secuencia de su genoma y que permite la introducción de ADN exógeno, ya sea por transformación, transducción o electroporación. El Servicio de Cultivos Biológicos cuenta con una colección de cepas de Escherichia coli que es utilizada por los miembros del IBVF en trabajos de ADN recombinante.

Listado de cepas

CEPA

Genotipo

E. coliBL21 (DE3)

F- ompT (lon) hsdS(rB-mB-, una E. coli B) con DE3.

E. coliBL21 (DE3) lacIq

F´::Tn10 proA+B+ lacIq D(lacZ)M15/ ompT (lon) hsdS (rB-mB-, una E. coli B) con DE3.

E. coli BL21 (DE3) pLysS

F- ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm (DE3) pLysS (CmR)

E. coliBL21 (DE3)(pIZ227)

pIZ227 porta, junto con lacIq, un gen de una lisozima específica de la polimerasa T7. Cmr.

E. coliBL21 CodonPlus(DE3)-RIL

E. coliB F- ompT (lon) hsdS(rB-mB-) dcm+ Tetr gallHte (argU ileY LeuW Cmr)     -argU, AGA/AGG; IleY, AUA; LeuW, CUA-

E. coli BL21 Rosetta(DE3)pLys

F-ompThsdSB(rB-mB-) gal dcm (DE3)pLysRARE (CmR) (tRNAs para AGG, AGA, AUA, CUA, CCC y GGA en pLys)

E. coli BL21-AI

F- ompT hsdSB (rB-mB-)gal dcm araB::T7RNAP-tetA  lon (tetR)

E. coli BL21-T1R

F- ompT hsdSB(rB-mB-) gal dcm tonA  

E. coli C41(DE3)

F ompT hsdSB (rB- mB-)gal dcm (DE3)

E. coli C43(DE3)

F ompT hsdSB (rB- mB-)gal dcm (DE3)

E. coli CC118 lambda pir

Delta(ara-leu) araD delta lacX74 galE galK phoA20 thi rpsE rpoB argE(am)recA (lambda pir)

E. coli DB3.1

F- gyrA462 endA1 (sr1-recA) mcrB mrr hsdS20(rB-, mB-) supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(SmR) xyl-5 - leu mtl1     ‘gateway’

E. coli DH10B T1R

F mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara leu) 7697 galU galK rpsL nupG λ– tonA

E. coliDH5a

 

F- supE44 hsdR17 (rK-rK+) recA1 girA96 (Nalr) endA1 thi-1 relA1 D(lacZYA-argF) (Ø80lacZDM15) U169

E. coli GM119

F- dam-3 dcm-6 metB1 galK2 galT22 lacY1 tsx78 supE44 (thi1 tomA31 mtl1)

E. coliHB101

 

F- hsdS20(rB-mB-) leu supE44 ara14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20 xyl-5 mtl-1 recA13 mcrB

E. coliJM109

traD36 lacIq D(lacZ)M15 proA+B+/e14-(McrA-) D(lac-proAB) thi gyrA96(Nalr) endA1 hsdR17 (rK-mK+) relA1 supE44 recA1

E. coliJM109(DE3) endA1, recA1, gyrA96, hsdR17(rk-, mk+), relA1, supE44, lambda -, Delta(lac-proAB), [F', traD36, proAB, lacIqZdeltaM15]/ DE3

E. coli K12

Silvestre

E. coli Lemo21(DE3)

fhuA2 [lon] ompT gal (DE3)[dcm] DhsdS/pLemo (CmR)

E. coli S17-1

Lambda pir

RecA thi pro hsdR-M+ RP4:2-Tc:Mu:Km::Tn7 (Tpr Smr) (lambda pir)

E. coli SG13009 (pREP4)

F-thi lac mtl;  pREP4(KmR, lacIq)

E. coliXL1-Blue

 

F´::Tn10 proA+B+ lacIq D(lacZ)M15/recA1 endA1 gyrA96(Nalr) thi hsdR17 (rK-mK+) supE44 relA1 lac

E.coli Solu (BL21)

F- ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm (DE3)

E. coli XL1-Blue MRA (P2)

D(mcrA)183 D(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA 1supE44 thi-1 gyrA96 relA1 lac (P2 lysogen)

E.coliMC1061

 

F-  araD139 D(ara-leu)7696 galE15 galK16 D(lac)X74 rpsL(Strr) hsdR2 (rK- mK+) mcrA mcrB1

Medios de cultivo

Medio BG110 (Rippka et al, 1979)

 

  Na2CO3   

0,2 mM   

 H3BO

46 µM           

MgSO4         

0,3 mM

MnCl2      

9,1 µM

CaCl       

0,24 mM

Na2MoO4

1,6 µM

K2HPO4

0,2 mM

ZnSO4     

0,8 µM

ácido cítrico  

28,5 µM

CuSO         

0,3 µM

citrato férrico-amónico (17% Fe)

6 mgl-1

CoCl    

0,2 µM

Na2-EDTA

2,4 µM

 

 


El medio se prepara a partir de un concentrado 100x que carece del K2HPO4 y de la fuente de nitrógeno, los cuales se añaden antes de esterilizar en el autoclave.

Para medio sólido se utiliza Bacto-Agar a concentración final 1% p/v. Éste se autoclava, en la mitad de volumen final, por separado de los nutrientes y se mezcla con los mismos antes de verterlo en las cajas Petri.


Medio BG11 

Medio BG110 suplementado con NaNO3 a una concentración final de 17,6 mM.


Medio BG11C 

Medio BG110 suplementado con NaNO3 a una concentración final de 17,6 mM y NaHCO3 a una concentración final de 10 mM.


Medio ASN-III (Rippka et al, 1979)

 

NaCl                          25 g/l

citrato férrico-amónico (17% Fe)       0,003 g/l

MgSO        3,5 g/l

Na2-EDTA                                        0,0005 g/l

MgCl2.6H2O             0,24 mM

Na2CO                                           0,04 g/l

KCl                           0,5 g/l

Metales traza (A5+Co)                      1 ml/l

K2HPO4                   0,02 g/l

 

NaNO3                            0,75 g/l

 

CaCl2.2H2O              0,5 g/l

 

ácido cítrico               0,003 g/l

 

 

Metales traza (A5 + Co)

H3BO3                                    3,09 g/l

MnSO4.4H2O                         2,9 g/l

ZnSO4.7H2O                           0,29 g/l

(NH4)6Mo7O24.4H2O              0,62 g/l

CuSO4. 5H2O                          124 mg/l

CoCl2.6H2O                            240 mg/l

 

Medio Sueoka 

KH2PO4                      8,3 mM

K2HPO4                      5,3 mM

MgSO4.7H2O              0,25 mM

CaCl2.2H2O                0,133 mM

TRAZAS HUTNER  1x

NH4Cl                         9,35 mM

 

Para medio sólido se utiliza Bacto-Agar a concentración final 1% p/v. Éste se autoclava, en la mitad de volumen final, por separado de los nutrientes y se mezcla con los mismos antes de verterlo en las cajas Petri.


Trazas Hutner 200x:

  1. Se disuelven 12,7 g de EDTA-Na.2H2O en 250 ml de agua.
  2. Se disuelven 1 a 1 por este orden, calentando previamente a 100ºC, en 500 ml de agua:

- H3BO3                            2,28 g

- ZnSO4.7H2O                   4,40 g

- MnCl2.4H2O                   1,02 g

- FeSO4.7H2O                   1,00 g

- CoCl2.6H2O                    0,32 g

- CuSO4.5H2O                  0,32 g

- (NH4)6MoO24.4H2O       0,22 g

  1. Se mezclan las dos soluciones anteriores.
  2. Se lleva hasta 100ºCy se deja enfriar hasta 80-90ºC.
  3. Se ajusta el pH a 6,8 con KOH 20% (Tª siempre >70ºC)
  4. Se lleva el volumen hasta 1 litro con agua destilada y se guarda en oscuridad durante 2 días, tras lo cual se puede utilizar.

 

Medio H 

Medio Sueoka suplementado con 1,5 g/l de proteosa peptona.

 

Medio Cyanidium 

K2HPO4

0,3 g

CaCl2         

0,02 g

MgSO4.7H2O

0,3 g

KNO3

3,0 g

FeSO4.7H2O

0,003 g

H2SO4

1,8 g

Metales traza (A5+Co)

1 ml/l

Agua (hasta 1 litro)

 

 

Metales traza (A5 + Co)

H3BO3                                    3,09 g/l

MnSO4.4H2O                         2,9 g/l

ZnSO4.7H2O                           0,29 g/l

(NH4)6Mo7O24.4H2O              0,62 g/l

CuSO4. 5H2O                          124 mg/l

CoCl2.6H2O                            240 mg/l

 

Medio Euglena

Acetato sódico                   1 g

Extracto de carne               1 g

Bacto-triptona                    2 g

Extracto de levadura          2 g

CaCl2.2H2O                   10 mg

Agua (hasta un litro)

 

Para medio sólido se utiliza Bacto-Agar a concentración final 1% p/v.


Medio f/2 de Guillard 

Añadir a 998 ml de agua de mar natural 1 ml de los stocks 1 y 3. Autoclavar y añadir, una vez frío, 200 µl del stock 2 (esterilizado por filtración 0,2 µm).

 

Stock1. Metales traza.

 

Stock 2. Complejo vitamínico.

 

Stock 3.

EDTA-Na2               4,16 g

A. nicotínico                    1 mg/ml

KNO3             15 g

FeCl3. 6H2O              3,15 g

A. para-aminobenzoico   1 mg/ml

NaH2PO4     1,13 g

CuSO4. 5H2O            0,01 g

NaHCO3                      0,5 mg/ml

Agua

(hasta 100 ml)

ZnSO4. 7H2O          0,022 g

Tiamina HCl                0,5 mg/ml

 

CoCl2. 6H2O             0,01 g

Biotina                          0,1 mg/ml

 

MnCl2. 4H2O            0,18 g

Vit. B12                    0,035 mg/ml

 

Na2MoO4. 2H2O      0,006g

 

 

Agua (hasta un litro)

 

 

 

Medio Dunaliella

Solución base (4x)

 

Microelementos (1000x)

KCl                                      20 mM

MnCl2.4H2O                             7 mM

MgCl2.6H2O                         20 mM

CuCl2.2H2O                              1 mM

Na2SO4                                20 mM

ZnCl2                                        1 mM

CaCl2.2H2O                         0,8 mM

CoCl2.6H2O                              1 mM

 

Fe3+-EDTA (1000x)

 FeCl3.6H2O                2 mM

 NaEDTA                    5 mM

 

Otros (concentraciones finales)

NaNO3                        5 mM

NaCl                           0,5 M (medio sólido)/3 M (medio líquido)

KH2PO4                      0,2 mM

NaHCO3                    50 mM

Esterilizar por autoclave (el KH2PO4 y el NaHCO3 se autoclavan por separado). Para medio sólido se utiliza Bacto-Agar a concentración final 1% p/v. Éste se autoclava, en la mitad de volumen final, por separado de los nutrientes y se mezcla con los mismos antes de verterlo en las cajas Petri.

 

Medio Navicula 

NaNO3                                           1,18 mM

K2HPO4                          77 mM

Na2SiO3                          0,86 mM

Triptona                           1 g/l

Concentrado BG11          2x

Para medio sólido se utiliza Bacto-Agar a concentración final 1,5% p/v. Éste se autoclava, en la mitad de volumen final, por separado de los nutrientes y se mezcla con los mismos antes de verterlo en las cajas Petri.

 

Medio Acaryochloris 

NaNO3

200 mg

Na2HPO4

1,4 mg

K2HPO4

5 mg

NH4Cl

2,68 mg

Fe-EDTA          

5,2 mg

Mn-EDTA

0,332 mg

Na2-EDTA         

37,2 mg

ZnSO4.7H2O

0,023 mg

CoSO4.7H2O       

0,014 mg

Na2MoO4.H2O      

0,0073 mg

CuSO4.5H2O        

0,0025 mg

H2SeO3

0,0017 mg

MnCl2.4H2O       

0,18 mg

Thiamin-HCl      

0,2 mg

Biotin

0,0015 mg

VitaminB12

0,0015 mg

Agua de mar         

hasta 1000 ml